Kaupapa Whakamātau
Hemoglobin electrophoresis e whai ana ki te kimi me te whakaū i nga momo hemoglobin noa me te rerekee.
Na te rereke o nga utu me nga tohu isoelectric o nga momo hemoglobin rereke, i roto i tetahi otinga waipara pH, ina he iti iho te ira isoelectric o te hemoglobin i te pH o te otinga parepare, ka mau te hemoglobin i te utu kino ka heke ki te anode i te wa o te electrophoresis. Engari, ko te hemoglobin me te utu pai ka neke ki te cathode.
I raro i tetahi ngaohiko me muri i te waa hiko hiko, ka whakaatuhia e nga hemoglobin he rereke nga utu me nga taumahatanga rapoi i nga ahunga rereke me nga tere. Ma tenei ka taea te wehe i nga rohe motuhake, ka taea te mahi tātaritanga karawai, electrophoretic ranei o muri mai ki runga i enei rohe hei tatau i nga momo hemoglobin. Ko te tikanga tino whakamahia ko te pH 8.6 cellulose acetate membrane electrophoresis.
I roto i te cytoplasm, ko nga roopu ethylene glycol (CHOH-CHOH) kei roto i nga matū glycogen, polysaccharide ranei (pērā i te mucopolysaccharides, mucoproteins, glycoproteins, glycolipids, me etahi atu) ka oxidized e te waikawa o te waa ka huri hei roopu aldehyde (CHO-CHO). Ka hono enei roopu aldehyde ki te reagent Schiff papura-whero kore tae, ka hanga he waikano papura-whero ka tuu ki nga polysaccharides kei roto i te pūtau. Ko tenei tauhohenga e mohiotia ana ko te whakakikoruatanga waikawa-Schiff (PAS), i kiia i mua ko te whakakikorua i te glycogen.
Tikanga Whakamatau
Rauemi:Cellulose acetatememparani, taputapu electrophoresis(DYCP-38C me te tuku hiko DYY-6C ), Utauta Uta Tauira Pai (paipa), spectrophotometer, cuvettes colorimetric, pūreirei.
Pūreirei:
(1) pH 8.6 TEB Buffer: Paunatia 10.29 g Tris, 0.6 g EDTA, 3.2 g waikawa boric, me te tāpiri wai māturu ki te 1000 ml.
(2) Borate Buffer: Paunatia te 6.87 g borax me te 5.56 g waikawa boric, me te taapiri i te wai makuku ki te 1000 ml.
Tikanga:
Pte whakatikatika i te Hemoglobin Solution
Tangohia te 3 ml o te toto kei roto he heparin, konutai citrate ranei hei anticoagulant. Whakanuia i te 2000 rpm mo te 10 meneti ka makahia te plasma. Horoia nga ruma toto whero e toru nga wa ki te tote whaiaroaro (750 rpm, 5 meneti te centrifugation ia wa). Whakanuia ki te 2200 rpm mo te 10 meneti ka maka te supernatant. Tāpirihia he wai māturu kia rite, kātahi ka tāpirihia kia 0.5 whakareatanga te rōrahi o te waro tetrachloride. Kia kaha te ruru mo te 5 meneti, katahi ka whakahiatohia ki te 2200 rpm mo te 10 meneti hei kohi i te otinga Hb o runga hei whakamahi i muri mai.
Te whakamau i te Membrane
Tapahia te membrane cellulose acetate ki nga takai 3 cm × 8 cm te rahi. Waiwai ki roto i te waipara pH 8.6 TEB kia tino kukū, katahi ka tango ka muru ki te pepa tātari.
Te whakakitenga
Whakamahia he paipa hei tohu poutū te 10 μl o te otinga hemoglobin ki runga i te kiriuhi acetate cellulose (te taha taratara), tata ki te 1.5 cm mai i te tapa.
Electrophoresis
Ringihia te wairewa wairewa borate ki roto i te ruma hiko. Whakanohoia te membrane cellulose acetate me te taha purepure ki te pito cathode o te ruma. Whakahaere i te 200 V mo te 30 meneti.
Whakawhanawhana
Tapahia nga rohe HbA me te HbA2, tuu ki roto i nga ipuipu motuhake, ka tapirihia te 15 ml me te 3 ml o te wai maturu. Me ruru marie kia whakakorea te hemoglobin, ka uru.
Taenga
Kore te urunga ma te whakamahi i te wai maturu mo te wairewa elution me te ine i te mimiti i te 415 nm.
Tātaitanga
HbA2(%) = Absorbance of HbA2 tube / (Absorbance of HbA tube × 5 + Absorbance of HbA2 tube) × 100%
Te Tatau Hua Whakamatau
Awhe Tohutoro mo te pH 8.6 TEB Buffer Cellulose Acetate Electrophoresis: HbA> 95%, HbA2 1%-3.1%
Notes
Kaua e roa rawa te wa electrophoresis. Ko te membrane cellulose acetate kaua e maroke i te wa o te electrophoresis. Kati te electrophoresis ina tino wehea te HbA me te HbA2. Ka taea e te electrophoresis te roa te whakamaoritanga o te roopu me te rangirua.
A ape i te whakamahi tauira nui rawa. Ko te nui o te wai o te hemoglobin ka arahi ki te wehenga roopu, ki te kore rawa ranei o te poke, ka hua he pikinga HbA.
Aukati i te poke o te membrane cellulose acetate me nga pūmua.
Kaua te au e tiketike rawa; ki te kore, kare pea nga roopu hemoglobin e wehe.
Me whakauru i nga wa katoa nga tauira mai i nga tangata noa me nga hemoglobin rereke e mohiotia ana hei mana whakahaere.
Ko Beijing Liuyi Biotechnology te hanga i te tank electrophoresis ngaio mo te electrophoresis hemoglobin koinei te tauiraDYCP-38Ccellulose acetate membrane electrophoresis tank, a e rua nga tauira o te hiko hiko hiko mo te cellulose acetate membrane electrophoresis tankDYY-2CaDYY-6Ctuku hiko.
I tenei wa, ko Beijing Liuyi Biotechnology e whakarato ana i te membrane cellulose acetate membrane mo nga kaihoko, a ka taea te whakarite i te rahi o te cellulose acetate membrane. Nau mai ki te patai mai ki a maatau mo nga tauira me etahi atu korero.
He nui ake i te 50-tau te hitori o Beijing Liuyi i Haina ka taea e te kamupene te whakarato hua pumau me te kounga teitei puta noa i te ao. I roto i nga tau o te whakawhanaketanga, he pai ki a koe te whiriwhiri!
Kei te rapu hoa taatau inaianei, kei te powhirihia nga tank electrophoresis OEM me nga kaitoha.
Mena kei a koe etahi mahere hoko mo a maatau hua, kaua koe e mangere ki te whakapiri mai ki a maatau. Ka taea e koe te tuku karere mai ma te imeera[kua tiakina te imeera]ranei[kua tiakina te imeera], waea mai ranei ki a matou i te +86 15810650221 me te taapiri Whatsapp +86 15810650221, Wechat ranei: 15810650221
Wā whakairinga: Sep-20-2023