Polyacrylamide Gel Electrophoresis
Ko te electrophoresis gel he tikanga taketake i roto i nga taiwhanga puta noa i nga tikanga koiora, ka taea te wehe i nga macromolecules penei i te DNA, RNA me nga pūmua. Ko nga momo momo papaa me nga tikanga wehe ka taea te wehe i nga waahanga iti o enei ngota ma te whakamahi i o raatau ahuatanga tinana. Mo nga pūmua, ko te polyacrylamide gel electrophoresis (PAGE) te tikanga e whiriwhiri ana.
Ko te PAGE he tikanga e wehewehe ana i nga macromolecules penei i te pūmua i runga i to raatau hikohiko hiko, ara, te kaha o nga tātari ki te neke ki tetahi hiko o te utu rereke. I te PAGE, ka whakatauhia tenei e te utu, te rahi (te taumaha o te ngota) me te ahua o te ngota. Ka neke nga kaitatari i roto i nga pores i hangaia i roto i te polyacrylamide gel. Kaore i rite ki te DNA me te RNA, he rereke te whakahaere o nga pūmua i runga i nga waikawa amino kua whakauruhia, ka taea te awe i te rere. Ko nga aho waikawa amino ka hanga i nga hanganga tuarua e pa ana ki te ahua o te rahi me te pehea e taea ai e ratou te neke i roto i nga pores. I etahi wa ka pai ki te whakakore i nga pūmua i mua i te electrophoresis ki te whakariterite i a raatau mena ka hiahiatia he whakatau tata mo te rahi.
SDS wharangi
Ko te konutai-dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis he tikanga hei wehe i nga ngota ngota pūmua o te 5 ki te 250 kDa. Ka wehea nga pūmua i runga noa i te taumaha o te ngota. Ko te konutai dodecyl sulfate, he surfactant anionic, ka taapirihia ki te whakareri i nga ra e huna ana i nga utu o roto o nga tauira pūmua ka hoatu he utu rite ki te ōwehenga papatipu. I roto i nga kupu ngawari, ka whakakorehia e ia nga pūmua ka hoatu he utu kino.
Maori PAGE
Ko te PAGE Maori he tikanga e whakamahi ana i nga reera kore-denatured mo te wehenga o nga pūmua. Kaore i rite ki te SDS PAGE, karekau he kaikawe denaturing e tapirihia ki te whakarite i nga ra. Ko te mutunga, ko te wehenga o nga pūmua i runga i te utu me te rahi o nga pūmua. I roto i tenei tikanga, ko te hangai, te kopa me nga mekameka waikawa amino o nga pūmua ko nga mea e whakawhirinaki ana te wehenga. Kaore e pakaru nga pūmua i roto i tenei tukanga, ka taea te whakaora i muri i te otinga o te wehenga.
Me pehea te mahi hiko polyacrylamide gel electrophoresis (PAE)?
Ko te kaupapa matua o te PAGE ko te wehe i nga tātaritanga ma te whakawhiti i roto i nga pores o te gel polyacrylamide ma te whakamahi i te hiko hiko. Hei whakatutuki i tenei, ko te ranunga acrylamide-bisacrylamide ka polymerized (polyacrylamide) ma te taapiri o te ammonium persulfate (APS). Ko te tauhohenga, he mea whakakorikorihia e te tetramethylethylenediamine (TEMED), ka hanga he kupenga rite ki te hanganga me nga pores e taea ai e nga tātari te neke (Whakaahua 2). Ko te teitei ake o te paheketanga o te katoa o te acrylamide kei roto i te kaera, ka iti ake te rahi o te pore, no reira ka iti ake nga pūmua ka uru atu. Ko te ōwehenga o te acrylamide ki te bisacrylamide ka pa ki te rahi o te pore engari ka mau tonu tenei. Ko nga rahi o te pore iti ka whakaiti i te tere e taea ai e nga pūmua iti te neke i roto i te reera, te whakapai ake i te whakatau me te aukati i te rere tere ki roto i te parepare ina tukuna ana te waa.
Nga taputapu mo te Polyacrylamide Gel Electrophoresis
Pūtau Electrophoresis Gel (Tank/Rua)
He rereke te tank reera mo te polyacrylamide gel electrophoresis (PAGE) mai i te tank agarose gel. He whakapae te taika gel agarose, ko te tank PAGE he poutū. Ma te pūtau electrophoresis poutū (tank/chamber), ka ringihia he kiri angiangi (te tikanga 1.0mm, 1.5mm ranei) i waenganui i nga papa karaihe e rua ka whakairihia kia rukuhia te raro o te gel ki roto i te parai i roto i te ruma kotahi, ka rukuhia te runga ki te papaa i tetahi atu ruma. I te wa e whakamahia ana, ka heke te iti o te parapara i roto i te ra mai i te ruuma o runga ki te ruma o raro. Ma nga awhi kaha ki te whakapumau i te noho tika o te huihuinga, ka tere te rere o te reera me te whakamatao ka puta mai he roopu motuhake.
Ka hangaia e Beijing Liuyi Biotechnology Co., Ltd. (Liuyi Biotechnology) te maha o nga rahi o nga pūtau hiko polyacrylamide gel electrophoresis (taaka / ruma). Ko nga tauira DYCZ-20C me DYCZ-20G he pūtau electrophoresis poutū (tanks / ruma) mo te tātari raupapa DNA. Ko etahi o nga pūtau electrophoresis poutū (taaka / ruma) he hototahi ki te punaha blotting, penei i te tauira DYCZ-24DN, DYCZ-25D me DYCZ-25E he hototahi ki te tauira punaha Western Blotting DYCZ-40D, DYCZ-40G me DYCZ-40F, e whakamahia ana mo te whakawhiti i te ngota ngota pūmua mai i te kiri ki te kiriuhi. I muri i te SDS-PAGE electrophoresis, Western Blotting he tikanga ki te kite i tetahi pūmua motuhake i roto i te ranunga pūmua. Ka taea e koe te whiriwhiri i enei punaha blotting i runga i nga whakaritenga whakamatautau.
Whakawhiwhi Hiko Hiko
Hei whakarato i te hiko mo te rere i te ra, ka hiahia koe ki te hiko hiko hiko. I Liuyi Biotechnology ka whakaratohia e matou he momo hiko hiko hiko mo nga tono katoa. Ko te tauira DYY-12 me te DYY-12C me te ngaohiko pumau teitei me te waa ka taea te whakatutuki i nga hiko hiko teitei. Kei a ia te mahi o te tu, te wa, te VH me te tono taahiraa-i-taahiraa. He pai mo te IEF me te DNA raupapa electrophoresis tono. Mo te tono pūmua whānui me te DNA electrophoresis, kei a matou te tauira DYY-2C, DYY-6C, DYY-10, me etahi atu, he taonga hiko hoko wera me nga pūtau electrophoresis (tanks / ruma). Ka taea enei te whakamahi mo nga tono electrophoresis ngaohiko waenga me te iti, penei mo te whakamahi taiwhanga kura, taiwhanga hohipera me etahi atu. Ko etahi atu tauira mo nga taputapu hiko, tirohia to maatau paetukutuku.
Ko te waitohu Liuyi neke atu i te 50 tau te hitori i Haina ka taea e te kamupene te whakarato hua pumau me te kounga teitei puta noa i te ao. I roto i nga tau o te whakawhanaketanga, he mea tika maau!
Mo etahi atu korero mo matou, tena koa whakapā mai ma te imeera[kua tiakina te imeera] or [kua tiakina te imeera].
Tohutoro mo He aha te polyacrylamide gel electrophoresis?
1. Karen Steward PhD Polyacrylamide gel electrophoresis, pehea te mahi, nga momo rereke, me ona tono
Te wa tuku: Mei-23-2022